موبائل مرحلہ خون کے مائع مرحلے کے برابر ہے۔، اور استعمال کے دوران توجہ دینے کے لئے مختلف چیزیں ہیں۔ ان میں کچھ "خرابیاں" ہیں جن پر توجہ دینا ضروری ہے۔
01. نامیاتی سالوینٹ شامل کرنے کے بعد موبائل فیز کے پی ایچ کی پیمائش کریں۔
اگر آپ پی ایچ کو ایک نامیاتی اضافی کے ساتھ ماپتے ہیں، تو آپ کو حاصل ہونے والا pH نامیاتی سالوینٹ شامل کرنے سے پہلے سے مختلف ہوگا۔ تاہم، سب سے اہم چیز مستقل مزاجی ہے۔ اگر آپ ہمیشہ نامیاتی سالوینٹ کو شامل کرنے کے بعد پی ایچ کی پیمائش کرتے ہیں، تو یقینی بنائیں کہ آپ جو طریقہ استعمال کرتے ہیں اس میں اپنے اقدامات بیان کریں تاکہ دوسرے بھی اسی طریقہ پر عمل کریں۔ یہ طریقہ 100% درست نہیں ہے، لیکن کم از کم یہ طریقہ کو برقرار رکھے گا۔ یہ درست پی ایچ ویلیو حاصل کرنے سے زیادہ اہم ہو سکتا ہے۔
02. کوئی بفر استعمال نہیں کیا گیا۔
بفر کا مقصد پی ایچ کو کنٹرول کرنا اور اسے تبدیل ہونے سے روکنا ہے۔ بہت سے دوسرے طریقے موبائل مرحلے کے پی ایچ کو تبدیل کرتے ہیں، جو برقرار رکھنے کے وقت، چوٹی کی شکل، اور چوٹی کے ردعمل میں تبدیلی کا سبب بن سکتے ہیں۔
فارمک ایسڈ، ٹی ایف اے، وغیرہ بفر نہیں ہیں۔
03. عام پی ایچ رینج کے اندر بفر کا استعمال نہ کرنا
ہر بفر میں 2 پی ایچ یونٹ رینج کی چوڑائی ہوتی ہے، جس کے اندر یہ بہترین پی ایچ استحکام فراہم کرتا ہے۔ اس ونڈو کے باہر بفرز پی ایچ تبدیلیوں کے خلاف موثر مزاحمت فراہم نہیں کریں گے۔ یا تو صحیح رینج میں بفر استعمال کریں، یا ایک ایسا بفر منتخب کریں جو آپ کی ضرورت کی pH رینج کا احاطہ کرے۔
04. نامیاتی محلول میں بفر شامل کریں۔
ایک نامیاتی مرحلے کے ساتھ بفر محلول کو ملانا زیادہ تر ممکنہ طور پر بفر کو تیز کرنے کا سبب بنے گا۔ بہت سے معاملات میں، یہاں تک کہ اگر بارش ہوئی ہے، تب بھی اس کا پتہ لگانا مشکل ہے۔ ہمیشہ پانی کے مرحلے میں نامیاتی محلول شامل کرنا یاد رکھیں، جو بفر بارش کے امکانات کو بہت حد تک کم کر سکتا ہے۔
05. ایک پمپ کے ساتھ 0% سے حراستی میلان کو مکس کریں۔
آج دستیاب پمپس موبائل فیزز اور ڈیگاس ان لائن کو مؤثر طریقے سے ملا سکتے ہیں، لیکن آپ کا طریقہ استعمال کرنے والے ہر شخص کے پاس اعلیٰ معیار کا پمپ نہیں ہوگا۔ A اور B کو ایک ہی حل میں مکس کریں اور اسے 100% ان لائن چلائیں۔
مثال کے طور پر، 950 ملی لیٹر نامیاتی ابتدائی مرکب 50 ملی لیٹر پانی میں ملا کر تیار کیا جا سکتا ہے۔ اس کا فائدہ یہ ہے کہ یہ HPLCs کے درمیان تغیر کو کم کر سکتا ہے اور سسٹم میں بلبلوں اور بارش کے امکان کو کم کر سکتا ہے۔ یہ بات قابل غور ہے کہ پمپ مکسچر کا تناسب 95:5 ہے، جس کا مطلب یہ نہیں ہے کہ بوتل میں پہلے سے ملا ہوا برقرار رکھنے کا وقت بھی 95:5 ہے۔
06. بفر کو تبدیل کرنے کے لیے درست ترمیم شدہ ایسڈ (بیس) کا استعمال نہ کرنا
صرف اس تیزاب یا بیس کا استعمال کریں جو بفر نمک کی تشکیل کرتا ہے جو آپ استعمال کر رہے ہیں۔ مثال کے طور پر، ایک سوڈیم فاسفیٹ بفر صرف فاسفورک ایسڈ یا سوڈیم ہائیڈرو آکسائیڈ کے ساتھ تیار کیا جانا چاہیے۔
07. طریقہ میں بفر کے بارے میں تمام معلومات نہیں بتانا، جیسے کہ 5 گرام کا اضافہ کرناسوڈیم فاسفیٹ 1000 ملی لیٹر پانی.
بفر کی قسم pH کی حد کا تعین کرتی ہے جسے بفر کیا جا سکتا ہے۔ مطلوبہ ارتکاز بفر کی طاقت کا تعین کرتا ہے۔ 5 گرام یا اینہائیڈرس سوڈیم فاسفیٹ اور 5 گرام مونوسوڈیم فاسفیٹ مونوہائیڈریٹ میں مختلف بفر طاقتیں ہوتی ہیں۔
08. چیک کرنے سے پہلے نامیاتی سالوینٹس شامل کرنا
اگر پچھلے طریقہ میں بیس لائن B کے لیے بفر سلوشن استعمال کیا گیا ہے، اور آپ کا طریقہ بیس لائن B کے لیے ایک نامیاتی محلول استعمال کرتا ہے، تو امید ہے کہ آپ بفر کو پمپ نلیاں اور پمپ ہیڈ میں بسا سکتے ہیں۔
09. بوتل اٹھائیں اور آخری قطرہ خالی کریں۔
اس بات کا ایک اچھا موقع ہے کہ آپ کے پاس پوری دوڑ کو مکمل کرنے کے لیے کافی موبائل فیز نہیں ہوگا اور آپ کا نمونہ تمباکو نوشی کرے گا۔ پمپ سسٹم اور کالم کے جل جانے کے امکان کے علاوہ، موبائل فیز مکمل طور پر بخارات بن جائے گا اور بوتل کے اوپر والا موبائل فیز بدل جائے گا۔
10. الٹراسونک degassing موبائل مرحلے کا استعمال کریں
سب سے اہم نکتہ یہ یقینی بنانا ہے کہ تمام بفر نمکیات تحلیل ہو جائیں، لیکن یہ ڈیگاس کا سب سے برا طریقہ ہے اور موبائل فیز کو تیزی سے گرم کر دے گا، جس سے نامیاتی اجزاء بخارات بن جاتے ہیں۔ بعد میں غیر ضروری پریشانی سے بچنے کے لیے، اپنے موبائل فیز کو ویکیوم فلٹر کرنے کے لیے پانچ منٹ لگائیں۔
پوسٹ ٹائم: اگست 27-2024