کرومیٹوگرافی کی اصل

کہاں: H: بورڈ کی اونچائی ہے۔
A: ایڈی پھیلاؤ کی اصطلاح کا گتانک
B: مالیکیولر ڈفیوژن ٹرم کا گتانک
C: بڑے پیمانے پر منتقلی مزاحمت کی اصطلاح کا گتانک

(2) Giddings مساوات

مقداری اور معیاری تجزیہ
(1) کوالٹیٹو تجزیہ
کوالٹیٹو کرومیٹوگرافک تجزیہ ان مرکبات کا تعین کرنا ہے جس کی نمائندگی ہر کرومیٹوگرافک چوٹی سے ہوتی ہے۔چونکہ مختلف مادوں کی مخصوص کرومیٹوگرافک حالات میں برقرار رکھنے کی مخصوص قدریں ہوتی ہیں، اس لیے برقرار رکھنے کی قدر کو کوالٹیٹو انڈیکس کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔مختلف کرومیٹوگرافک معیار کے طریقے فی الحال برقرار رکھنے کی اقدار پر مبنی ہیں۔
تاہم، مختلف مادوں میں ایک ہی کرومیٹوگرافک حالات کے تحت ایک جیسی یا ایک جیسی برقرار رکھنے کی قدریں ہوسکتی ہیں، یعنی برقرار رکھنے کی قدریں خصوصی نہیں ہیں۔اس طرح صرف برقرار رکھنے کی اقدار کی بنیاد پر مکمل طور پر نامعلوم نمونے کی خصوصیت کرنا مشکل ہے۔اگر نمونے کے ماخذ، نوعیت اور مقصد کو سمجھنے کی بنیاد پر، نمونے کی ساخت کا ابتدائی فیصلہ کیا جا سکتا ہے، اور درج ذیل طریقے استعمال کیے جا سکتے ہیں جس کی نمائندگی کرومیٹوگرافک چوٹی کے مرکب کا تعین کر سکتی ہے۔
1. خالص مادوں کا استعمال کرتے ہوئے کوالٹیٹو کنٹرول
مخصوص کرومیٹوگرافک حالات کے تحت، کسی نامعلوم کے پاس صرف برقرار رکھنے کا ایک مقررہ وقت ہوتا ہے۔لہذا، نامعلوم کو ایک ہی کرومیٹوگرافک حالات کے تحت معلوم خالص مادہ کے برقرار رکھنے کے وقت کا نامعلوم مادہ کے برقرار رکھنے کے وقت کے ساتھ موازنہ کرکے قابلیت کے ساتھ شناخت کیا جاسکتا ہے۔اگر دونوں ایک جیسے ہیں تو نامعلوم مادہ ایک معلوم خالص مادہ ہو سکتا ہے۔دوسری صورت میں، نامعلوم خالص مادہ نہیں ہے.
خالص مادہ کنٹرول کا طریقہ صرف اس نامعلوم مادہ پر لاگو ہوتا ہے جس کی ساخت معلوم ہو، جس کی ساخت نسبتاً آسان ہو، اور جس کا خالص مادہ معلوم ہو۔
2. رشتہ دار برقرار رکھنے کی قدر کا طریقہ
رشتہ دار برقرار رکھنے کی قدر α، جزو i اور حوالہ جاتی مواد کے درمیان ایڈجسٹمنٹ سے مراد برقرار رکھنے کی قدروں کا تناسب:

یہ صرف درستگی اور کالم کے درجہ حرارت کی تبدیلی کے ساتھ تبدیل ہوتا ہے، اور اس کا دیگر آپریٹنگ حالات سے کوئی تعلق نہیں ہے۔

ایک مخصوص سٹیشنری مرحلے اور کالم کے درجہ حرارت پر، جزو i اور حوالہ مادہ s کی ایڈجسٹ شدہ برقراری قدروں کو بالترتیب ماپا جاتا ہے، اور پھر مندرجہ بالا فارمولے کے مطابق شمار کیا جاتا ہے۔حاصل کردہ رشتہ دار برقرار رکھنے والی اقدار کا ادب میں متعلقہ اقدار کے ساتھ معیار کے ساتھ موازنہ کیا جاسکتا ہے۔
3، چوٹی کی اونچائی کے طریقہ کار کو بڑھانے کے لیے معلوم مادہ شامل کرنا
جب نامعلوم نمونے میں بہت سے اجزا ہوتے ہیں، تو حاصل شدہ کرومیٹوگرافک چوٹیاں اتنی گھنی ہوتی ہیں کہ مندرجہ بالا طریقہ سے آسانی سے شناخت نہیں کی جا سکتی، یا جب نامعلوم نمونے کو صرف مخصوص شے کے تجزیہ کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔
"پہلے کسی نامعلوم نمونے کا کرومیٹوگرام بنایا جاتا ہے، اور پھر نامعلوم نمونے میں ایک معلوم مادہ شامل کرکے مزید کرومیٹوگرام حاصل کیا جاتا ہے۔"بڑھتی ہوئی چوٹی کی اونچائی والے اجزاء کو اس طرح کے مادوں کے لئے جانا جاسکتا ہے۔
4. انڈیکس کے معیار کے طریقہ کار کو برقرار رکھیں
ریٹینشن انڈیکس فکسٹیو پر مادوں کے برقرار رکھنے کے رویے کی نمائندگی کرتا ہے اور فی الحال GC میں سب سے زیادہ استعمال شدہ اور بین الاقوامی سطح پر تسلیم شدہ کوالٹیٹیو انڈیکس ہے۔اس میں اچھی تولیدی صلاحیت، یکساں معیاری اور چھوٹے درجہ حرارت کے گتانک کے فوائد ہیں۔
برقرار رکھنے کا اشاریہ صرف اسٹیشنری مرحلے اور کالم کے درجہ حرارت کی خصوصیات سے متعلق ہے، لیکن دیگر تجرباتی حالات سے نہیں۔اس کی درستگی اور تولیدی صلاحیت بہترین ہے۔جب تک کالم کا درجہ حرارت اسٹیشنری مرحلے کے برابر ہے، ادب کی قدر کو شناخت کے لیے لاگو کیا جا سکتا ہے، اور تقابل کے لیے خالص مواد استعمال کرنا ضروری نہیں ہے۔
(2) مقداری تجزیہ
chromatographic quantification کی بنیاد:
مقداری تجزیہ کا کام مخلوط نمونے میں سو اجزاء کو تلاش کرنا ہے۔
جزوی مواد۔Chromatographic quantification مندرجہ ذیل پر مبنی تھا: جب آپریٹنگ حالات مسلسل تھے، تھا

ناپے ہوئے جزو کی ماس (یا ارتکاز) کا تعین ڈٹیکٹر کے ذریعہ دیے گئے ردعمل کے سگنل سے ہوتا ہے۔
یہ متناسب ہے۔یعنی:

chromatographic quantification کی بنیاد:
مقداری تجزیہ کا کام مخلوط نمونے میں سو اجزاء کو تلاش کرنا ہے۔
جزوی مواد۔Chromatographic quantification مندرجہ ذیل پر مبنی تھا: جب آپریٹنگ حالات مسلسل تھے، تھا
ناپے ہوئے جزو کی ماس (یا ارتکاز) کا تعین ڈٹیکٹر کے ذریعہ دیے گئے رسپانس سگنل سے ہوتا ہے۔
یہ متناسب ہے۔یعنی:

1. چوٹی کے علاقے کی پیمائش کا طریقہ
چوٹی کا علاقہ کرومیٹوگرام کے ذریعہ فراہم کردہ بنیادی مقداری ڈیٹا ہے، اور چوٹی کے رقبے کی پیمائش کی درستگی مقداری نتائج کو براہ راست متاثر کرتی ہے۔مختلف چوٹی کی شکلوں والی کرومیٹوگرافک چوٹیوں کے لیے پیمائش کے مختلف طریقے استعمال کیے گئے تھے۔
مقداری تجزیہ میں موسم سرما کی صحیح قدر تلاش کرنا مشکل ہے:
ایک طرف انجیکشن کے مطلق حجم کی درست پیمائش کرنے میں دشواری کی وجہ سے: دوسری طرف
چوٹی کا علاقہ کرومیٹوگرافک حالات پر منحصر ہے، اور جب قدر کی پیمائش کی جائے تو کرومیٹوگرافک پٹی کو برقرار رکھا جانا چاہیے۔
ایک ہی کام کرنا نہ تو ممکن ہے اور نہ ہی آسان۔اور یہاں تک کہ اگر آپ اسے صحیح طریقے سے حاصل کرسکتے ہیں۔
صحیح قدر، اس لیے بھی کہ کوئی متفقہ معیار نہیں ہے اور براہ راست لاگو نہیں کیا جا سکتا۔

2. مقداری اصلاحی عنصر

مقداری اصلاحی عنصر کی تعریف: پتہ لگانے والے میں داخل ہونے والے اجزاء کی مقدار (m)
اس کے کرومیٹوگرافک چوٹی کے علاقے (A) یا چوٹی کی اونچائی () کا تناسب ایک تناسب مستقل ہے (،
تناسب مستقل کو جزو کے لئے مطلق درستی عنصر کہا جاتا ہے۔

مقداری تجزیہ میں موسم سرما کی صحیح قدر تلاش کرنا مشکل ہے:
ایک طرف انجیکشن کے مطلق حجم کی درست پیمائش کرنے میں دشواری کی وجہ سے: دوسری طرف
چوٹی کا علاقہ کرومیٹوگرافک حالات پر منحصر ہے، اور جب قدر کی پیمائش کی جائے تو کرومیٹوگرافک پٹی کو برقرار رکھا جانا چاہیے۔
ایک ہی کام کرنا نہ تو ممکن ہے اور نہ ہی آسان۔اور یہاں تک کہ اگر آپ اسے صحیح طریقے سے حاصل کرسکتے ہیں۔
صحیح قدر، اس لیے بھی کہ کوئی متفقہ معیار نہیں ہے اور براہ راست لاگو نہیں کیا جا سکتا۔

یعنی، ایک جزو کا رشتہ دار اصلاحی عنصر 'جزو اور حوالہ مواد s ہے۔
مطلق اصلاحی عوامل کا تناسب۔

یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ متعلقہ اصلاحی عنصر اس وقت ہوتا ہے جب جزو کا معیار بمقابلہ معیار ہوتا ہے۔
جب مادہ s برابر ہوتا ہے، تو حوالہ مواد کا چوٹی کا رقبہ جزو کا چوٹی کا رقبہ ہوتا ہے۔
متعدد۔اگر کسی جز میں بڑے پیمانے پر m اور چوٹی کا رقبہ A ہے تو f'A کی تعداد
قدریں حوالہ مواد کے چوٹی کے رقبے کے برابر ہیں جس کے بڑے پیمانے پر ہیں۔دوسرے الفاظ میں،
متعلقہ اصلاحی عنصر کے ذریعے، ہر جزو کے چوٹی کے علاقوں کو الگ کیا جا سکتا ہے۔
اس کے بڑے پیمانے کے برابر حوالہ مواد کے چوٹی کے علاقے میں تبدیل، پھر تناسب
معیار متحد ہے۔لہذا یہ ہر جزو کی فیصد کا پتہ لگانے کا معمول کا طریقہ ہے۔
مقدار کی بنیاد۔
رشتہ دار اصلاحی عنصر حاصل کرنے کا طریقہ: رشتہ دار اصلاحی عنصر کی اقدار کا موازنہ صرف وجود سے کیا گیا۔
پیمائش معیاری اور ڈیٹیکٹر کی قسم سے متعلق ہے، لیکن آپریشن کی پٹی سے
اس سے کوئی فرق نہیں پڑتا۔لہٰذا ادب کے حوالوں سے اقدار کو حاصل کیا جا سکتا ہے۔اگر متن
اگر آپ پیشکش میں مطلوبہ قیمت نہیں پا سکتے ہیں، تو آپ خود بھی اس کا تعین کر سکتے ہیں۔عزم کا طریقہ
طریقہ: ماپا مادہ دس منتخب حوالہ مواد کی ایک مخصوص مقدار → ایک خاص حراستی میں بنایا گیا ہے
کرومیٹوگرافک چوٹی والے علاقوں A اور As دو اجزاء کی پیمائش کی گئی۔
یہی فارمولا ہے۔

3. مقداری حساب کتاب کا طریقہ
(1) ایریا نارملائزیشن کا طریقہ
تمام چوٹی سے پاک حصوں کے مواد کے مجموعے کو مقدار کے تعین کے لیے 100% شمار کیا گیا تھا۔
طریقہ کو نارملائزیشن کہا جاتا ہے۔اس کا حساب کتاب کا فارمولا درج ذیل ہے:

جہاں P، % جانچے گئے اجزاء کا فیصد مواد ہے۔A1, A2... A n جزو ہے 1. چوٹی کا رقبہ 1~n؛f'1، f'2... f'n اجزاء 1 سے n کے لیے متعلقہ اصلاحی عنصر ہے۔

(2) بیرونی معیاری طریقہ
نمونے میں ٹیسٹ کیے جانے والے جزو کے ردعمل کے سگنل اور کنٹرول کے طور پر جانچے جانے والے خالص جزو کے درمیان مقداری موازنہ کا طریقہ۔
(3) اندرونی معیاری طریقہ
نام نہاد اندرونی معیاری طریقہ ایک ایسا طریقہ ہے جس میں خالص مادہ کی ایک خاص مقدار کو جانچے گئے مادے کے معیاری محلول میں شامل کیا جاتا ہے اور نمونے کے محلول کو اندرونی معیار کے طور پر، اور پھر تجزیہ اور تعین کیا جاتا ہے۔
(3) معیاری اضافے کا طریقہ
معیاری اضافے کا طریقہ، جسے اندرونی اضافے کا طریقہ بھی کہا جاتا ہے، ایک مخصوص مقدار (△C) کو شامل کرنا ہے۔
جانچ کے لیے نمونے کے حل میں ٹیسٹ مادہ کا حوالہ شامل کیا گیا تھا، اور ٹیسٹ کو پرکھ میں شامل کیا گیا تھا۔
مادہ کے بعد نمونے کے حل کی چوٹی اصل نمونے کے حل سے زیادہ تھی۔
رقبہ کا اضافہ (△A) نمونے کے محلول میں مادے کے ارتکاز کا حساب لگانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔
مواد (Cx)

جہاں Ax اصل نمونے میں ماپا جانے والا مادہ کا چوٹی کا علاقہ ہے۔